Novye immunologicheskie markery (CD71 , LU-BCRU-G7), vzaimosvyazannye s prognozom raka molochnoy zhelezy

Full Text

И мм унологически е исследовани я рак а м о лочно й ж елез ы ( Р МЖ ) ведутс я п о са мы м различн ы м направлениям. С ред и ни х - поис к м аркеров , ассоциированн ы х с прогнозо м заболева ния , иммунологическо е стадировани е опухоли , анали з взаи мо дейст ви й опухол и и иммунно й систе мы , создани е противораковых вакци н и мно го е другое . Н а м и н а протяжени и последни х 1 5 ле т накопле н оп ы т имму - нофено типическог о изучени я Р МЖ . Трансферриновый рецептор О дни м и з рецепторов , опосреду ющ и х рос т нормальны х и опухолев ы х клеток , являетс я рецепто р тра нсферрин а (Т Ф Р ) . Т Ф Р - эт о белок , тра нспор тиру ющ и й ж елез о в крови . П р и ней траль ны х р Н содер ж а щ и й дв е мо лекул ы ж елез а тра нсферри н прочн о связ ы ваетс я с Т Ф Р и поступае т в эндосо мы , где пр и р Н ~ 5 ж елез о отщ епляется . Апо тра нсферри н (ТФР, н е содер ж а щ и й ж елеза ) остаетс я тес н о связанн ы м с Т Ф Р и тра нспор тируетс я обратн о н а мембран у клетки . П р и ней траль но й р Н апотранс ф ерри н имее т нез начи тель ну ю а ффинн ост ь к рецептор у и в ы свобо ж даетс я с поверхност и клетки , становитс я готов ы м к начал у ново г о цикл а ( E . M o rga n и соавт , 1983 ) . Э кспресси я Т Ф Р -рецептор а коррелируе т с м етастатически м потенциало м Р М Ж у мыш ей . Ч е м боле е агрессивн а опухоль , те м боль ш и е уровн и Т Ф Р он а экспрессируе т и те м в ыш е е е пролифе - ративн ы й индек с ( R.Elliott и соавт , 1993 ) . Уб едительно е доказа тельств о рол и экспресси и Т Ф Р в рост е опухолев ы х клето к Р М Ж получен ы в экспери м ента х н а кр ы син ы х клеточн ы х линия х (T.I nou e и соавт , 1993 ) . О пухолевые клетк и связ ы вал и тра нс ф е р р и н пропорциональн о и х м етастатическо м у потенциалу : М Т РаВ Ю > М Т РаВ 5 > М Т Ьп З > M T Ln 2 > М ТС > M T F 7 > М ТРа. Линии , да ющ и е м етастаз ы в мо зг, РаВ Ю и РаВ5 , наиболе е сильн о отвечал и н а тра нсферри н и имел и м акси м ально е количеств о Т Ф Р н а м е мбр ан е клеток . Ан алогичн ы е данн ы е получен ы н а линия х клето к Р М Ж человека . С пособност ь клето к Р М Ж кр ы с раст и в присутстви и Т Ф Р послу жи л а осново й дл я селекци и в ы соко м етастатически х вариан то в ( P . C avanaug h и соавт , 1998 ) . К летк и раков ы х линий , экспрес - сиру ющ и х ТФР, б ы л и способн ы в бесс ы вороточно й сред е обра зов ы ват ь колони и пр и добавлени и ТФР. К летк и лини и M T Ln 2 Р М Ж кр ы с тра нсфецировал и ДН К человека , кодиру ющ е й ТФР, и изучал и влияни е гиперэкспресси и Т Ф Р ( CD 71 ++ ) н а различн ы е клеточн ы е свойств а ( P . C avanaug h и соавт , 1999 ) . И сходна я и тра нсфецированна я лини и пролиферировал и с одинаково й скорость ю . У мыш е й nud e клетк и обеи х лини й ф ормировал и метастаз ы в легких , приче м CD 71 + + клетк и ф ормировал и боле е крупны е очаг и поражения , че м контрольн ы е . Д анно е набл ю дени е очен ь ва жн о с точк и зре ни я оценк и прогрессировани я рост а метастатически х очагов , та к ка к клиническо е обнару ж ени е и опас нос т ь дл я организм а м етастазо в ( в голов но й мо зг, легкие ) завися т о т рост а м етастатических клето к и ф ормировани я крупн ы х очаго в поражения . Таки м образом , в условия х с нормальны м содер ж ание м питатель ны х ве щ ест в клетк и Р МЖ , различа ющ иес я п о экспресси и ТФР, мо гу т пролиферироват ь сходн ы м образом . О днак о клетки , экспрессиру ющ и е ТФР, име ю т ростов ы е преиму щ ества , та к ка к способн ы пролиферироват ь по д влияние м тра нсферрин а и использоват ь Т Ф Р в качеств е ф актор а в ыжи вани я и рост а в очага х м етастатическог о поражения . И мм уно ф енотипическо е обследовани е н а предме т установле ни я экспресси и Т Ф Р н а опухолев ы х клетка х проведен о у 9 9 боль ны х Р МЖ . Бол ьн ы е получал и стандартно е лечение , вкл ю ча ющ е е хирургическо е удалени е опухол и ( операци и в объем е радикаль но й резекци и ил и м астэкто мии ) с последу ющ е й адъ ю вантно й терапие й ил и бе з таково й в зависи мо ст и о т степен и распростра неннос т и опухолевог о процесса . Э кспресси я Т Ф Р изучен а с помощ ь ю М КА1СО -8 8 ( А Ю . Б ар ышни ко в и соавт , 1997 ) и установ лен а в 7 0 случаях , в боль ш инств е и з ни х - мономорфн а я (5 2 лет, чт о дал о на м основани е оценит ь об щ у ю в ыжи вае мо ст ь ( ( ove ral l survival ) и в ыжи вае мо ст ь бе з признако в возврат а опу з ( D F S - d isease- fre e survival). В анализируе мо й групп е Т Ф Р б ы л экспрессирова н н а опу х в ы х клетка х 4 2 и з 5 2 больн ы х . Э кспресси я Т Ф Р н е влиял а н а щ у ю в ыжи вае мо сть , н о б ы л а достоверн о ( р = 0 , 039 ) связан а с , тель нос ть ю период а бе з признако в возврат а опухол и ( D FS ) . И зуче ни е крив ы х в ыжи вае мо ст и ( рис . 1 ) показало , чт о р а чи я обусловлен ы , вероятно , отсутствие м рецидивирован ] больн ы х , н е име ющ и х CD 7 1 н а м е мбр ан е раков ы х клеток . 1 в ы е D FS дл я груп п с мо заич но й и мономорфно й реакциям и б схо жими . Вм ест е с те м объединени е случае в с мономорфн < мо заич но й экспрессие й антиген а в одн у CD 71-позитивну ю г п у и сопоставлени е и х с антигеннегативно й группо й п о дли т нос т и D FS н е установил о достоверн ы х различи й П рогностическа я рол ь CD 7 1 у больн ы х Р М Ж реализов ы в а в срок и набл ю дения , превы ш а ющ и е го д посл е операции . В С ] групп е возвра т опухол и н е набл ю далс я н и в одно м случа е CD 7 1 -позитив ны х случая х эт о имел о м ест о у 43 % больн ы х . М ан а D FS н е достигалас ь н и в одно й и з групп , однако , пр и ста тическо м сопоставлени и крив ы х в ыжи вае мо ст и бе з приз н возврат а опухол и доказан о достоверно е положительно е вли; отсутствия экспресси и CD 7 1 н а в ыжи вае мо ст ь - уровен ь з н мо ст и различи й /р/ п о Ло г- Ран к 0 , 022 ; п о Бр есло у 0 , 026 ; п < рон-Уор е 0 , 02 4 ( рис . 2). Таки м образом , прогностическа я рол ь Т Ф Р -рецептор а за: чаетс я в то м , чт о в срок и о т 1 год а д о 6 ле т посл е операци и ш вод у Р М Ж в CD 7 1 - не гатив но й групп е возврат а опухол и н е на» дается . Учи т ы ва я стол ь ва жн о е влияни е экспресси и Т Ф Р -рецепто ! прогноз , м ы провел и углубленно е изучени е взаи мо связ и пресси и CD 7 1 н а опухол и с о степень ю диссе мин аци и РМ ) регионарн ы м ли мф атически м узла м (РЛУ). У 4 7 больн ы х а ь лярн ы е ли мф атически е узл ы б ы л и промаркирован ы в зави с ст и о т и х располо ж ени я п о отно ш ени ю к м ало й груд но й м ы I уровен ь - ли мфо узл ы , располо ж енн ы е латеральн о ил и под : не й гра нице й м ало й груд но й мышцы ; I I уровен ь - ли мфо ^ располо ж енн ы е позад и м ало й груд но й мышцы ; III уровен ь - ф оузл ы , располо ж енн ы е м едиальне е ил и на д верхне й гра н м ало й груд но й мышцы . Ч астот а экспресси и Т Ф Р в анализируе мо й групп е больн ы ставил а 59 , 6 % (2 8 больн ы х) . Э кспресси я CD 7 1 н е имел а дост ( но й связ и ( р = 0 , 2 ) с наличие м м етастазо в в регионарн ы х л и тически х узлах : N + в CD 71-негативно й групп е - 31 , 6 % ( 6 и з CD 71-позитивно й групп е - 50 % ( 1 4 и з 28) . М етастазирова ! РЛУ I уровн я так ж е н е зависел о о т экспресси и CD 7 1 н а оп у И н терес ны е взаи мо связ и отмечен ы м е ж д у экспрессие й CD ' опухол и и развитие м м етастазо в в РЛУ II и III уровней . В F уровн я м етастаз ы в CD 71-негативно й групп е больн ы х в ы лис ь в 3 раз а ча щ е , че м в CD 71-позитивно й группе : 33 , 3 % ( 9 т и 10 , 5 % ( 2 и з 19 ) . Ан али з перекрестных табли ц показа л су щ е вани е достоверно й положительно й связ и м е ж д у эти м и пар ; рами : d С омерс а 0 ,3 , р = 0 , 048 . Н езависи мо й переменно й в случа е являлас ь экспресси я CD 7 1 н а опухолево й тка ни , и м это т призна к определя л развити е м етастазо в Р М Ж в РЛУ II ' ня . Ещ е боле е четки е взаи мо связ и м е ж д у экспрессие й Т Ф цептор а и м етастатически м потенциало м опухол и о т м е ч е т изучени и РЛУ III уровня . П р и отсутстви и Т Ф Р н а опухол и стаз ы н е в ы являлись : 0 и з 1 6 случаев . В случая х экспресси и ( мономорфно й ил и мо заич ной ) м етастаз ы обнару ж ен ы в случае в ( у 5 и з 2 2 больн ы х) . С татистически е данн ы е указ ы в а су щ ествовани е четко й взаи мо связ и м е ж д у показателями : х хи-квадра т П ирсон а = 0 , 041 ; дл я d С омерса р = 0 , 012 . Следус ратит ь вни м ание , чт о тольк о морфо логически м м етодо м п мон стрирован а четка я корреляци я м е ж д у экспрессие й C I м етастатически м поражение м РЛУ II и III уровней . Н и оди н i пользованных дл я диагностик и м етастазо в иммуногистохи ] ски х м аркеро в ( E gp34 , цитокератин ы 7 и 8 , HM F G - 1 , РЭА) н з ы ва л н а су щ ествовани е подобно й связи . Т . е . можн о пре д жи ть , чт о CD 7 1 влияе т н е н а са м процес с м етастазировани ; боле е б ы стр ы й рос т м етастазов , котор ы е и в ы явля ю тс я м с логически . больн ы х) . Д остоверно й связ и экспресси и Т Ф Р с о стадие й опухол и и индексо м N н е набл ю дали . У половин ы больн ы х (5 2 челове ка ) длительност ь послеоперационног о набл ю дени я превысил а 5 Ре зультат ы на ш и х исследовани й свидетельству ю т о TOÍ экспресси я Т Ф Р -рецептор а н а клетка х Р М Ж способствуе т б ы стро м у рост у м етастазо в в ли мф атически х узла х II и III не й и являетс я ф акторо м , способству ющ и м возврат у опу х срок и о т 1 год а д о 6 ле т посл е радикально й операции . Углеводная детерминанта Ш-ВСВи-С 7 В числ е новы х опухолеспеци фи чески х мо лекул , име ю щ и х связ ь с прогнозо м Р МЖ , на з ы ваетс я углеводна я детер мин ант а Ш - ВС1 Ш - С 7 (Р.Яуе и соавт., 1994 ) . В а жн ост ь этог о м аркер а определя етс я в перву ю очеред ь те м , чт о о н являетс я прогностическ и значим ы м пр и ранни х стадия х Р МЖ . С это й цель ю б ы л о проведен о ретроспективно е исследовани е экспресси и антиген а у 8 9 боль ны х Р М Ж I - И а стадий , радикальн о п р о о п е р и р о в а н н ы х в 1994 - 199 5 гг. М оноклональн ы е антител а Ш - ВС1 Ш -0 7 б ы л и любезн о предоставлены Р.Яуе ( Н орвегия ) . Вы делен ы следу ющ и е градаци и экспресси и антиген а н а рако в ы х клетках : полно е отсутствие , м ене е 10%, 10 -50 % , 50-90 % и присутстви е антиген а практическ и н а все х опухолев ы х клетка х ( мономорфны й ти п реакции ) . П омим о процент а антигенополо - жи тель ны х клето к набл ю далас ь так ж е вариабельност ь в интен сивност и экспресси и антиген а н а раков ы х клетках . Н аиболе е част о набл ю далос ь отсутствие антиген а н а раков ы х клетка х (3 8 пациенток , 42 , 2 % о т и х об щ ег о числа ) . К а ж д ы й и з промежуточных типо в реакци и встречалс я с п р и м е р н о равно й частото й ( 11 - 13 % ) . М ономор фн а я экспресси я отмечен а в 20 % случае в ( 1 8 больн ы х) . М ы н е отметил и су щ ествовани я связ и экспресси и антиген а с об щ е й в ыжи вае мо сть ю больн ы х Р МЖ . Вм ест е с те м пр и анализ е в ыжи вае мо ст и бе з признако в возврат а опухол и боле е хоро ш и е показател и отмечен ы в групп е больн ы х , н е име ющ и х LU- BCRU- G 7 н а м е мбр ан е раков ы х клето к ( рис . 3). Э т а те нденци я отсутст вовал а пр и I стади и ( рис . 4) , н о имел а м ест о пр и П а стади и Р М Ж ( рис . 5) . Вм ест е с те м ухуд ш ени я прогноз а п о м ер е нарас та ни я экспресси и антиген а н е отмечали . Н апротив , ни зка я в ыжи вае мо ст ь отмечен а пр и миним ально й экспресси и антиген а - м ене е 10 % ( рис . 6). П оис к иммунологически х м аркеров , ассоциированн ы х с про г но зо м ранни х стади й Р МЖ , являетс я актуально й задачей . Н а сегод ня ш ни й ден ь таки х м аркеро в описан о крайн е м ало . В и х числ е антиген , в ы являем ы й МКА NCRC 11 , котор ый , ка к оказалось , взаи мо связа н с о степень ю ди фф еренцировк и опухолев ы х клето к (I.Ellis и соавт., 1987 ; R.W alker, 1990 ) . МКА LU - BCR U - G 7 распозна ю т углеводну ю детер мин ант у ( кон цевы е остатк и галактоз ы в (31-3- ил и p i - 4 связях ) гликопротеи н а с мо лекулярно й м ассо й 23 0 к Да н а м е мбр ан е клето к Р МЖ . Экспресси я антиген а н е связан а с о статусо м стероидн ы х рецепто ров , стадие й Р М Ж и наличие м м етастазо в в регионарн ы х ли мф а тически х узлах . О тсутствие экспресси и антиген а ассоциирова лос ь с боле е хоро ш им и показателями в ыжи вае мо ст и у больн ы х Р МЖ , н е име ющ и х м етастазо в в регионарн ы х ли мф атически х узла х (P.Rye и соавт., 1994 ) . Н ару ш ени я процессо в гликозилирова ни я пр и рак е - эт о хоро ш о известный ф ено м е н ( L S m e t s и соавт., 1984 ) . Гликоконъ ю гат ы игра ю т ва жн у ю рол ь в нормальны х м е ж клеточн ы х взаи мо дейст виях , и специ фи чески е повреждени я гликозилирова ни я мо гу т влият ь н а рос т и м етастазировани е опухолев ы х клеток . П олученн ы е нам и данн ы е позволил и подтвердить , чт о отсутстви е экспресси и антиген а LU - BCR U - G 7 являетс я ф акторо м благоприят но г о прогноз а н а ранни х стадия х Р М Ж и в особенност и пр и П а стадии . Таки м образом , представленные в работ е результат ы указы ваю т н а целесообразност ь исследовани я дву х новы х м аркеро в клето к Р МЖ . Т Ф Р -рецепто р способствуе т рост у ге м атогенн ы х и ли мфо ге нны х м етастазо в Р МЖ , и отсутствие CD 7 1 являетс я ф акторо м благоприятног о прогноз а в срок и о т 1 год а д о 6 ле т посл е операции . Биоло гическа я рол ь углеводног о антиген а LU- BCRU- G 7 н а сегодня ш ни й ден ь н е известна , отсутствие это й детер ми нан т ы н а м е мбр ан е опухолев ы х клето к являетс я ф акторо м боле е благоприятног о прогноз а пр и Н а стади и Р МЖ . Список литературы смотрите на нашем сайте в Интернете.

About the authors

N N Tupitsyn

V P Letyagin

A V Panichenko

M B Vasil'ev

S A Shinkarev

E V Artamonova

N A Ognerubov

V D Ermilova

S N Ryazantseva

Supplementary files