Izmenenie kislorodzavisimoy antikandidoznoy i antimikrobnoy aktivnosti neytrofilov onkogematologicheskikh bol'nykh so smeshannoy gribkovo-bakterial'noy infektsiey pri terapii s ispol'zovaniem rchG-KSF

Full Text

Введение В результат е мно гочисле нны х клинически х набл ю дени й установлено , чт о инфекци и грибково-бактериаль но й природ ы являю тс я одни м и з наиболе е част о встреча ющ ихс я осло жн ени й посл е иммуносупрессивно й полихимиотерапи и ( П Х Т ) у онкогема тологически х больн ы х н а ф он е ней тропе ни и [ 1 -3] . С у щ еству ю т сведени я о то м , чт о гриб ы род а Candida spp. сти м улиру ю т инфек ц и о н н ы й процесс , в ы зва нны й бактериям и [4, 5]. В вид у в ы соко й дия ) в комплекс е с компь ю теро м IBM P C пр и те мп ератур е счетно й камер ы 37°С, постоянно м переме ш ивани и и вре м ене м съе м а интегральног о показател я свечени я образц а - 5 с . Люмино л-уси - ленна я хе мо л юм инесценци я - Х Л ( ЛХЛ ) регистрировал а вес ь пул АФ К и отра ж ал а активност ь ми елопероксидаз ы ( МП О ) и Н АД ФН -оксидаз ы , а л ю цегинин-усиленна я Х Л ( ЛЦХЛ ) регистри _ ровал а образовани е супероксидног о анион-радикал а ( • 0 2 ) и оценивал а активност ь Н АД ФН -оксидаз ы . И з м ерял и спонтанну ю 8 с м ертност и онкогематологически х больн ы х из-з а вторичн ы х Х Л в тече ни е 1 5 мин , зате м Н Л активировал и О З ( 10 частиц/мл ) инфекци й [2] в последни е год ы вни м ани е исследователе й сф оку ил и убит ым и опсонизированн ым и гриба м и Candida albicans 7 сирован о н а усилени и м еханиз мо в естественно й резистентнос ( 10 частиц/мл ) . Реак тив ну ю Х Л измерял и непрерывн о в тече ни е т и в дополнени е к об ы чно й анти микробно й и противогрибко во й терапи и [6, 7]. Н аиболе е су щ ественн ы м зве но м в антигрибко во й и антибактериально й за щ ит е организм а о т эти х микроор га ни з мо в явля ю тс я ней тро фи л ы ( Н Л ) , э фф ективност ь действи я котор ы х в о мно го м связан а с образование м им и активн ы х ф о р м кислород а - АФ К (су пероксидный анион-радикал , перекис ь водорода , гидроксиль ны й радика л и др . ) [8, 9]. Ра звити е опухолево г о процесс а и противоопухолева я терапи я оказ ы ва ю т мо ди фи циру ющ е е действи е н а гра нулоци топоэ з онкогематологически х больн ы х , част о набл ю даетс я сни ж ени е активност и НЛ. В это й связ и ва жн о е з начени е уделяетс я коррекци и анти микробно й актив нос т и НЛ. В клиническо й онкологи и ш ирок о используетс я рекомбинант - н ы й человечески й гра нулоци тар ны й колониестимулиру ющ и й ф акто р ( рчГ- КС Ф - нейпо ге н , гра ноци т ) с цель ю лечени я нейтропении . С пособност ь рчГ- КС Ф сти м улироват ь пролифераци ю , ди фф еренцировк у и активност ь Н Л в ы з ы вае т интере с к ег о поте нциальном у применени ю пр и лечени и и н ф е к ц и о н н ы х осло ж нени й [6, 7, 10, 11] . Тем н е м ене е недос таточ н о ясн а рол ь рчГ- КС Ф в биохимически х м еханиз м а х изменени я кислородзависимо й антикандидозно й и анти микробно й активност и Н Л онкогемато логически х больн ы х . Ц ель ю нас тоя щ е й работ ы явилос ь изучени е действи я рчГ - КСФ -терапи и н а Н АД ФН - и ми елопероксидазозависи мо е образо вани е АФК Н Л онкогематологически х больн ы х с о с м е ш анно й грибково-бактериаль но й инфекцией . Материал ы и методы исследования И сследовал и кислородзависиму ю антикандидозну ю (КЗАА) и анти микробн у ю активност ь ( К ЗАМ А) Н Л периферическо й кров и о т 8 6 доноро в и 6 больн ы х , у котор ы х д о начал а терапи и рчГ - КС Ф пр и микробио логическо м исследовани и патологическог о м атериал а находил и гриб ы С . albicans и бактери и Staphilococcus aureus, энтерококки . С редни й возрас т пациенто в состави л 3 8 лет . П осл е проведенног о курс а П Х Т п о схе м е ВАЕМ у ни х набл ю дал и ф ебрильну ю ней тропе ни ю (III- IV стадии , ВОЗ ) . Бол ьн ы м на з на чал и рчГ- КС Ф ( фи лграсти м подкожн о в доз е 5 мкг/кг, чере з 1 ден ь посл е окончани я П Х Т ) в тече ни е 6- 8 дней , антигрибкову ю (а мфо терици н Б ) и антибактериальну ю ( карбапенем ы , цефалос - порины , а мино гликозид ы , ванко мицин ) терапи ю . Ф ункциональ ну ю активност ь покоя щ ихс я Н Л больн ы х и и х КЗАА, КЗАМ А оце нивал и д о начал а ( 0 ч ) и чере з 3 ; 24 ; 72 ; 14 4 и 36 0 ч посл е начал а терапи и рчГ- КСФ . Вы делени е Н Л и з периферическо й кров и больн ы х и доноро в проводил и п о стандартно й м етодик е [12]. КЗАА и КЗАМ А Н Л оценивал и п о и х способност и к образова ни ю АФ К пр и инкубаци и с опсонизированн ым и гриба м и Candida albicans и опсонизированн ы м зи мо за но м ( О З ) соответственно . П родукци ю АФ К Н Л регистрировал и хе мо л юм инометричес - ки м м етодо м с помо щ ь ю хе мо л юм инометр а LKB 125 1 ( Ф инлян 12 0 мин , Х Л оценивал и п о следу ющ и м параметрам: Асп - м акси м альна я а мп литуд а спонтанно й ХЛ, Scn - светосу мм а спонтанно й ХЛ, А инд (03 ) ил и А и ( С albicans) - м акси м альна я а мп литуд а реактивно й ХЛ, 5 ИНД (03 ) ил и SHH/j(C. albicans) - светосу мм а реактив но й ХЛ, коэ ф ф и ц и е н т К - равн ы й отно ш ени ю показателе й светосу м м ЛЦХ Л к ЛХ Л и пропорциональный удельно м у количе ств у супероксидног о анион-радикал а в об щ е й продукци и АФК. Амп литуд а Х Л отра ж ал а способност ь к одномоментно й ге нера ци и АФК, а пло щ ад ь (свет осумма ) по д Х Л крив ым и опис ы вал а су мм арну ю способност ь Н Л к образовани ю АФК. О бработк у полученн ы х данн ы х проводил и н а компь ю тер е IBM P C с использо вание м программ ы " L u m inog raf' . С татистически й анали з результато в проводил и с помо щ ь ю програм м E xce l ( M icrosoft, С Ш А ) , S ta tistic a 6,0 ( Statsoft, Zn c , С Ш А ) . Д остоверност ь различи й сравнивае мы х величи н оценивал и с помощ ь ю параметрическог о t- критери я С ть ю дента ; непараме три ческог о Т-критери я Ви лкоксона . Ра зличи я считал и достоверн ы м и пр и / К 0 , 05 . Результаты Ан али з полученны х данн ы х показал , чт о дина мик а образова ни я АФ К Н Л пациенто в в процесс е терапи и рчГ- КС Ф носил а мно го ф азов ы й характер , указ ы ва ющ и й н а сло жн у ю цеп ь соб ы тий , связанн ы х с активацие й Н Л в процесс е лечения . Д о начал а тера пи и рчГ- КС Ф м акси м альна я а мп литуд а и светосу мм а спонтанно й ЛЦХ Л б ы л и достоверн о в ыш е нормы , чт о указ ы вал о н а актива ци ю м етаболиз м а кислород а в покоя щ ихс я Н Л больн ы х . П р и стим уляци и Н Л гриба м и С albicans ил и О З светосу мм а ЛЦХ Л превыш ал а з начени я дл я доноро в н а 12 8 и 48 % соответственно . Вы соки е исходны е показател и Н АД ФН -зависи мо г о образовани я АФ К Н Л больн ы х н е б ы л и связан ы с действие м анти микробно й терапи и [ 13, 14], а определялис ь наличие м грибково-бактериаль но й инфекции . П оказател и спонтанно й и индуцированно й ЛХЛ б ы л и достоверн о ниж е показателе й дл я доноро в ( рис . 1 -3 ) и свиде тельствовал и о нару ш ени и и х МП О -зависи мо г о анти микробно г о потенциала . Ч ере з 3 и 2 4 ч посл е начал а терапи и с рчГ- КС Ф уровн и спон та нно й а мп литуд ы ЛЦХ Л и показател и индуцированно й ЛЦХ Л (С. albicans) и ЛЦХ Л ( О З ) дл я Н Л больн ы х оставалис ь в ыш е нор м ы (с м . рис . 2 , 3). Э т и данн ы е указ ы ва ю т н а то , чт о посл е одно кратног о введени я препарат а н е происходил о нормали заци и актив нос т и Н АД ФН -оксидаз ы Н Л и уровн и супероксидног о анион - радикал а оставалис ь повы ш енн ыми . К а к видн о и з рис . 2 , м акси м альна я а мп литуд а и светосу мм а дл я ЛЦХ Л Н Л, сти м улированн ы х гриба м и С . albicans, достоверн о сни ж алис ь чере з 14 4 ч посл е начал а терапи и относительн о контро ля в 1,6 и 2,2 раз а соответственно и приближалис ь к показателя м дл я доноров . П осл е завер ш ени я терапи и и х з начени я оставалис ь ниж е нормы . С ледуе т отметить , чт о у м ень ш ени е спонтанно й ЛЦХ Л набл ю дал и у ж е посл е первог о введени я препарата , чт о можн о объяснит ь достаточн о б ы стр ы м нормали зу ющ и м э фф ек то м рчГ- КС Ф н а активност ь Н АД ФН -оксидаз ы Н Л , сти м улирован ны х присутству ющ им и патогенами . Ч ере з 36 0 ч посл е начал а терапи и а мп литуд а спонтанно й ЛЦХ Л Н Л пациенто в приближа лос ь к норме , чт о указ ы вал о н а сни ж ени е инфицируемост и паци ентов . Таки м образом , кур с рчГ- КС Ф терапи и приводи л к норма лизаци и Н АД ФН -зависи мо й антикандидозно й активност и Н Л пациентов . Н еобходи м о подчеркнуть , чт о у м ень ш ени е в ы соко й актив нос т и Н АД ФН -оксидаз ы покоя щ ихс я Н Л по д действие м рчГ - КС Ф особенн о ва жн о , та к ка к повы ш енна я ге нераци я • 0 2 ~ мож е т приводит ь к су щ ественно м у повреждени ю тка не й и органо в [8, 9]. С ледуе т отметить , чт о начальны е показател и коэ ффици енто в К ( С albicans) и К ( О З ) б ы л и в ыш е че м у доноров , ( в 2 и 3,3 раз а соответственно ) , чт о указ ы вал о н а увеличени е относительно й дол и О 2 ~ в об щ е й продукци и АФК. В процесс е терапи и это т показа тел ь приближалс я к з начения м дл я доноров . В отличи е о т ЛЦХ Л контрольн ы е показател и спонтанно й ЛХ Л дл я ней тро фи ло в пациенто в б ы л и супрессирован ы (с м . рис . 1). Ч ере з 2 4 ч посл е начал а терапии , эт и показател и приближалис ь к норм е и б ы л и достоверн о в ыш е начально г о уровн я в 2,4 и 4 ,7 раз а соответственно . П осл е отмен ы рчГ- КС Ф набл ю далс я спа д спонтанно й ге нераци и АФ К (с м . рис . 1 ). Таки м образом , посл е однокра т но г о введени я препарат а набл ю дал и за м етну ю сти м уляци ю МП О -зависи мо й ге нераци и А Ф К покоя щ имис я Н Л больн ы х и е е постепенно е сни ж ени е в процесс е курс а терапии . О т м ечен ны е уровн и продукто в МП О н е превы ш ал и норм ы и н е мо гл и оказ ы ват ь побочног о токсическог о действия . Д о начал а терапи и с рчГ- КСФ , показател и а мп литуд ы и светосу мм ы дл я ЛХЛ (С. albicans) б ы л и ниж е норм ы (с м . рис . 2 , а, б ) , а чере з 2 4 ч посл е начал а терапи и он и достоверн о увеличивалис ь относительн о начальны х з начени й в 4 ,6 и 8,4 раз а соответственн о (с м . рис . 2 , а , б ) , и превы ш ал и показател и дл я доноров . П осл е 14 4 ч отмечал и и х сни ж ени е и последу ющ у ю стабилизаци ю посл е отмен ы препарат а (с м . рис . 2 ) д о з начений , превы ш а ющ и х начальные . Д анн ы е ХЛ -а нали з а свидетельству ю т о то м , чт о пр и терапи и с использование м рчГ- КС Ф у онкогематологически х больн ы х с н е й тропе ние й набл ю далос ь б ы стро е увеличени е МП О -зависи мо й антикандидозно й активност и Н Л и в ы хо д е е н а уровн и в ыш е контрол я посл е окончани я терапии . Учи т ы ва я определя ющ у ю рол ь продукто в ми елопероксидаз ы ( НОС 1 , ОН - и др . ) в антикандидозно й активност и Н Л, эт о дол жн о б ы л о приво дит ь к увеличени ю и х КЗАА. Н а ш и результат ы согласу ю тс я с данным и [15], в котор ы х показано , чт о пр и введени и донора м рчГ - КС Ф (30 0 мк г/де н ь подкожн о в тече ни е 6 дней ) антигрибкова я активност ь Н Л увеличивалас ь в зависи мо ст и о т доз ы . Бы стро е увеличени е ЛХЛ ( О З ) д о норм ы отмечал и чере з 2 4 ч посл е начал а терапи и (с м . рис . 3 . а . б), пр и это м чере з 36 0 ч пока зател и м акси м ально й а мп литуд ы и светосу мм ы дл я ЛХЛ ( О З ) оставалис ь в ыш е контрол я в 1,4 и 1,9 раз а соответственно (с м . рис . 3 , а , б ) . Таки м образом , рчГ- КС Ф терапи я повы ш ал а КЗАМ А ней тро фи ло в з а сче т увеличени я ге нераци и АФК, чт о согласуетс я с данн ым и работ ы [ 16] п о анти микробно й активност и Н Л онколо гически х больн ы х посл е цитостатическо й терапии . Заключени е С у ммир у я полученны е данн ы е , необходим о отметить , чт о комплексна я терапи я (а н тигрибковая , антибактериальна я и рчГ - КСФ ) приводил а к нормали заци и показателе й ге нераци и АФ К покоя щ имис я Н Л и сти м улировал а МП О -зависи м у ю антиканди дозну ю и анти микробн у ю активност ь Н Л. Таки м образом , приме нени е рчГ- КС Ф в комплексно й терапи и больн ы х с инфекцие й грибково-бактериаль но й природ ы являетс я целесообразным.

About the authors

Z N Nikiforova

V E Shevchenko

N V Dmitrieva

N E Arnotskaya

T Stan'chik

References

Supplementary files